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植物基因组提取中液氮冷冻及研磨的作用是()

植物基因组提取过程中,液氮冷冻及研磨的作用是对样品进行急冻,使样品变硬,变脆,这样可以保证研磨的时候能够充分,均匀,DNA释放更充分。另外,提供一个相对低温的环境,对保证样品的稳定性也有帮助。CTAB(十六烷基三甲基溴化铵),是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性。在高离子强度的溶液中(>0.7mol/L NaCl),CTAB与蛋白质和多聚糖形成复合物,只是不能沉淀核酸。使用苯酚抽提细胞DNA时,苯酚的作用是使蛋白质变性,同时抑制了DNase的降解作用,氯仿的作用是克服酚的缺点;加速有机相与液相分层。 最后用氯仿抽提:去除核酸溶液中的迹量酚,异戊醇可以减少蛋白质变性操作过程中产生的气泡,用酚:氯仿:异戊醇(25::24:1)PH>7.8抽提,去蛋白,其后依旧用异丙醇沉淀,70%乙醇洗,并去除小分子RNA。
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