即将半抗－HBS包被于反应极凹孔底部，加入待检血清，如其中含有HBsAg则形成抗原、抗体复合物，再加入用辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶标记的半抗－HBS，形成抗原、抗体及酶标记抗体复合物，当加入底物盐酸苯二胺后，如果HBsAg阳性则显示橙黄色，可用目测或光电比色判定结果。
此法敏感度和固相放射免疫法相同，也可用以检测抗－HBS。临床已广泛用于许多疾病的病原学诊断和一些细胞因子的测定。